Ein hochwertiges Adenosin-Deaminase-Assay-Kit

Adenosin-Deaminase (ADA) ist ein natürliches Enzym, das an der Immunantwort beteiligt ist. Die Funktion von Adenosindiphosphat (ADP) besteht darin, die Zellen zu aktivieren und eine Membranpermeabilisierung sowie eine zytotoxische Wirkung zu erzielen. Adenosin gilt als eine der wichtigsten Aminosäuren, die für die normale Gehirnaktivität des Menschen erforderlich sind. Es wird von der Leber synthetisiert und durch die Wirkung des Immunsystems im Blutplasma verteilt. Adenosindiphosphat ist ein Träger des antiviralen genetischen Materials. Auf der Biomedical Expo wird das ADA Activity Assay Kit in Kombination mit dem bereits erwähnten BioVision Cytokine verwendet.

Adenosindiphosphat (ADP) ist ein Träger des T-Lymphozyten-Wachstumsfaktors. Im BioVision Cytokine wird Adenosin-Desaminase (ADO) aus der präparierten Niere extrahiert und mit einem kommerziell erhältlichen spektrophotometrischen automatisierten Assay analysiert. Das Reagenz wurde mit Anti-Phospho-dGlucose (PI) vorbehandelt, um eine Reaktion mit dem Analyten zu verhindern.

Die Zusammensetzung des im Handel erhältlichen AIDA Activity Assay Kit besteht aus zwei Hauptkomponenten – dem Reagenz und der Laborausrüstung. Zu den im Aida Activity Assay Kit enthaltenen Reagenzien gehört ein gereinigter Enzymcocktail (Sigma-FCA). Die Laborausrüstung besteht aus einem Mikroplattenscanner (hinter einem Objektträger aus Glas montiert), Glaswaren, einem Standardkurven-Ergebnisbuch und einer Spülflasche. Vor der Verwendung müssen die Proben des Aida Activity Assay Kit mit entchlortem Wasser gewaschen werden. Die Verwendung von Reagenzien und Laborgeräten ist nicht nur auf Labortests beschränkt.

Um die Fähigkeit des Aida Activity Assay Kit zur Messung der gesamten Adenosin-Desaminase-Aktivität zu untersuchen, wurden mehrere experimentelle Sitzungen durchgeführt. Die erste Sitzung bestand aus vier Tagen manueller Nachverfolgung. Einhundertfünfzig Mikroliter Aida-GFP wurden in Leitungswasser gelöst und mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung gemischt. Nach zwanzig Minuten wurden die Proben auf dem HPLC-Massenbilanzbildschirm getestet.

Die zweite Sitzung umfasste zwei zusätzliche Tage manueller Nachverfolgung. Proben wurden wie oben beschrieben zwei Stunden lang in die Kurvenkassette injiziert. Die dritte Sitzung umfasste drei weitere Tage manueller Nachverfolgung im selben Raum, gefolgt von vier Stunden subkutaner Injektion von Adenosindesaminase (ADCA). Die Blutprobe wurde nach einer Stunde zur Analyse entnommen.

Für den Speicheltest wurden fünfhundert Mikroliter Standardlösungen von Desaminase und pH-Rose in einem unsterilen Stempel gemischt. Die Schweine durften je nach Wunsch eine ganze Reihe von Flüssigkeiten trinken, von klarem Wasser bis hin zu Diätlimonade. Als die Standardlösungen ihren Siedepunkt erreichten, wurde eine Pipette mit einem vorgegebenen Speichelvolumen eingeführt und die Adenosin-Desaminase-Aktivität gemessen.

Die letzte Gruppe von sechs Proben wurde mit einem im Handel erhältlichen Speichel-basierten Phosphorimidazolamin-Assay-Kit (Saproflavil; Thermo Instruments) analysiert. Bei dieser Testreihe wurde ein einzelner Tropfen Phosphorimidazolamin/Speichel-Ada-Reagens mit einem Volumen Leitungswasser gemischt und das getrocknete Pulver zu den Proben gegeben. Nach dreißig Minuten wurde eine zweite Probe derselben Probe entnommen. In diesem Fall wurde die Aktivität im Speichel sofort gemessen. Das Kit wurde speziell für die Messung der Säureaktivität im menschlichen Speichel entwickelt. Wie erwartet konnte eine erhebliche Aktivität festgestellt werden.

Wie erwartet lieferten beide Analysegeräte ähnliche Ergebnisse. Die hochspezifische Natur der Speichel-Positronen-Emissions-Tomographie-Analyse (SPECT) führte zusammen mit der hochempfindlichen Methodik (hohe intraorale Flüssigkeitserkennung) zu einer konstant hohen Genauigkeit und aussagekräftigen Messungen. Das für die Verfahren eingesetzte Laborpersonal war allesamt Experte auf diesem Gebiet. Es gab keine Hinweise auf eine Kontamination oder einen Versuchsfehler irgendeiner Art. Die Testpersonen gaben ihr Einverständnis und das Verfahren folgte den Empfehlungen der American Association of Clinical Endocrinologists. Insgesamt zeigten die mit dem Adenosin-Deaminase-Assay-Kit erzielten Ergebnisse eine gute Reproduzierbarkeit, was durch separate Studien unabhängiger klinischer Labore bestätigt wurde.